问题标题:
请问:做荧光定量PCR时,△△Ct值是什么意思,它的计算公式是什么?△△Ct与Ct目的基因和Ct内参基因有什么关系?
问题描述:

请问:做荧光定量PCR时,△△Ct值是什么意思,它的计算公式是什么?△△Ct与Ct目的基因和Ct内参基因有什么关系?

钱春华回答:
  我这边有关于△△Ct法的相关文献以及推导公式,方便的话可以给我留一下你的邮箱
马洪勃回答:
  Ct=-klgX0+b(线性方程)用这个方程可以通过Ct值算出样品的起始浓度   斜率=-1/lg(1+e)   扩增效率E=1,斜率=-3.32   扩增效率范围:90%-110%   斜率范围:-3.1和-3.59之间   △△Ct这是相对荧光定量的一个计算公式的简化形式,用于比较不同样品之间的差别或变化比率   例如,想看a基因和b基因在某细胞系中表达量的差别,选取18s作为内参基因,就用a基因的Ct值减去18s的Ct值,得到△Ct1,用b基因的Ct值减去18s的Ct值得到△Ct2,然后用△Ct1-△Ct2=△△Ct,而a,b基因的表达量差别为2(-ΔΔCt)次方,当然这中计算方法是基于荧光定量的数学计算模型简化来的,平时随便用用没什么问题,如果你的两个目的基因的扩增效率不一样,这个计算方法是不能用的。
其它推荐
热门其它推荐