问题标题:
(2014•石家庄二模)科学工作者通过蒸因工程创造出了“蜘蛛羊”,该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白,高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域.请回答:(1)为保证实验成功,产生
问题描述:

(2014•石家庄二模)科学工作者通过蒸因工程创造出了“蜘蛛羊”,该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白,高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域.请回答:

(1)为保证实验成功,产生蛛丝蛋白的基因需要从______(基因组/c DNA)文库中获取,并与______等调控组件重组在一起,然后与载体相连构建成表达载体;再通过______方法,将表达载体导入羊的______,获得重组细胞.

(2)将获得的重组细胞培养成早期胚胎后,移植到经过处理的受体母羊子宫内.因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚,所以在早期胚胎的培养中,往往还需要添加______.若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊”可将早期胚胎进行______处理.

(3)若所得到的“蜘蛛羊”(已知表达载体已进入细胞)乳汁中没有检测到蛛丝蛋白,科学家为判断问题所在,应该采用______技术来检测.

侯婕回答:
  (1)目的基因可以从基因文库中获取,基因组文库中基因含有启动子和内含子,而cDNA文库中不含有.要使羊的乳汁中含有蛛丝蛋白,所以目的基因需要从cDNA文库中获取,并且要连上羊的乳腺蛋白基因的启动子,和载体构建成基因表达载体,通过显微注射的方法导入羊的受精卵中.   (2)早期胚胎培养时,培养液中需要添加动物血清、血浆等天然成分.要获得两头转基因“蜘蛛羊”,可以采用胚胎分割技术.早期胚胎移植时,需要对受体做同期发情处理,这样为供体的胚胎移入受体相同的生理环境.   (3)目的基因的检测与表达中,如果表达载体已经进入受体细胞,但没有检测蛛丝蛋白,则需要采用DNA分子杂交的方法,先检测蛛丝蛋白基因是否整合到羊的染色体,如果整合上了,就要继续采用分子杂交的方法,检测蛛丝蛋白基因是否转录出蛛丝蛋白的mRNA.   故答案为:   (1)cDNA 羊的乳腺蛋白基因的启动子 显微注射 受精卵   (2)同期发情 动物血清(动物血浆) 胚胎分割(胚胎分割移植)   (3)分子杂交
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